欢迎莅临南京bob综合app手机客户端bobapp官方下载苹果版有限公司官方网站!

  • 当前位置:主页 - 详细内容

    EFLUXX-ID® multidrug resistance assay kit多药耐药性检测试剂盒——监测三种ABC转运蛋白

          简单免洗检测,可同时监测3种耐药性相关的ABC转运蛋白耐药性是一种因ATP结合盒式(ATP Binding CassetteABC)膜转运蛋白家族上调介导所产生的现象。ABC转运蛋白的过度表达了加速有毒物质从细胞中的去除,例如化疗剂从肿瘤细胞中排出,或抗生素从耐药菌株中排出。Enzo的EFLUXX-ID® 多药耐药性检测试剂盒可实现同时对三种临床相关的 ABC 转运蛋白的功能检测:包括MDR1p-糖蛋白)、MRP1/2  BCRP


    ◆特点

    ● 简单免洗的操作步骤,结果可在1小时内获得

    ● 可检测与3ABC转运蛋白(MDR1p-糖蛋白)、MRP1/2BCRP)活性相关的耐药性

    ● 通过单一专用染料可定量检测活细胞中的多药耐药性(MDR)活性,并以MDR 活性因子(MAF)表征

    ● 试剂盒内含有三种已知的MDR1p-糖蛋白)、MRP1/2BCRP蛋白特异性抑制剂

    ● 可检测Calcein AM染料无法检测的BCRP蛋白活性

    ● 有绿色、金色两种荧光染料可供选择

    ● 两种染料均可与表达GFP的细胞系或其他CELLESTIAL® 染料同时使用

    ◆作用机制

     EFLUXX-ID®使用了一种疏水性非荧光化合物,这种化合物容易穿透细胞膜,经细胞内酯酶水解成亲水性荧光染料。除非EFLUXX-ID® 染料被泵出至细胞外,否则酯酶裂解的染料会一直存在于细胞内。因此,表现出耐药性的细胞将染料主动运输泵出胞外,会出现荧光减弱的现象。EFLUXX-ID® 检测是目前少有可同时监测三种主要的ABC转运蛋白并能够分析单泵活性的试剂盒。

      荧光团

      兼容的EFLUXX-ID® 试剂

    Cy 3 & Cy 5的偶联物、Pl7-AADAPCTexas RedRFPYFPTAMRAUVViolet 染料

      EFLUXX-ID® 绿色荧光染料

    GFP/eGFPRFPPI7-AADAPCCy 5的偶联物、Rhodamine   123Texas RedUVViolet 染料

      EFLUXX-ID® 金色荧光染料

    1EFLUXX-ID® 多药耐药性染料与其他荧光染料的兼容性



    1:对三种主要ABC转运蛋白的活性进行检测。使用EFLUXX -ID Green(上)、Gold(中)或Calcein AM(下)染料,通过流式细胞术评估CHO K1细胞中ABC转运蛋白的活性。与未处理的细胞相比,用ABC转运蛋白特异性抑制剂(图中阴影部分)处理可诱导染料保留在细胞内(图中实线部分)。平均荧光强度(MFI)的差异表明了对应蛋白的活性,在图中通过多药耐药性活性因子值(MAF)进行表征。更高的MAF值表明EFLUXX-ID染料对抑制剂有着良好的特异性。而Calcein AM染料的低MAF值表明其(常用的MDR检测探针)无法检测BCRP活性。



    2:使用EFLUXX-ID® Green和EFLUXX-ID® Gold染料在CHO K1细胞中评估已知抑制剂对ABC转运蛋白活性的结果分析。将细胞与试剂盒中含有的MDR普通抑制剂(左一)、转运蛋白特异性抑制剂在37°C下孵育5 min。随后在37°C下用指定的染料染色细胞30 min,并立即利用流式细胞术进行分析。所用抑制剂:5 µM环胞霉素 AMDR普通抑制剂)、20 µM维拉帕米(P-gp特异性抑制剂)、0.05 mM MK-571MRP特异性抑制剂)、0.05 mM新生霉素(BCRP特异性抑制剂)。



    图3:EFLUXX-ID® Green 490/514 nm ex/em和Gold 530/570 nm ex/em 试剂的光谱特性可与其他常见的荧光染料进行多重检测。


    产品详情

      应用

      流式细胞术,荧光显微镜

      应用说明

      EFLUXX-ID® 多药耐药性检测试剂盒可对活细胞(悬浮细胞和贴壁细胞)中的耐药表型进行检测和分析。

      品质保证

      每批次EFLUXX-ID® Gold耐药检测试剂盒的样品试剂盒均已按照操作手册中的步骤,对第5代和第20代间的

      CHO K1细胞系进行染色。获得的结果如下:

      1.   维拉帕米介导的抑制后MAF>80

      2. MK-571介导的抑制后MAF>60

      3. 新生霉素介导的抑制后MAF>40

      包装

      100 assays(流式细胞术)

      使用/稳定性

      自交货后,试剂盒组分在适当的储存条件下可稳定保存一年。

      储存条件

      避光。避免反复冻融。

      运输条件

      蓝冰运输

      短期储存

      -20°C

      长期储存

      -80°C

      组分

      2 瓶,EFLUXX-ID® GoldEFLUXX-ID® Green检测试剂

      300 nmolesMDR1 抑制剂(维拉帕米)

      750 nmolesMRP   抑制剂(MK-571

      1.5 µmolesBCRP 抑制剂(新生霉素)

      500 µL,碘化丙啶

      科学背景

      耐药性是一种由跨膜ATP结合盒(ATP   Binding Cassette   ,简称ABC)转运蛋白家族上调介导的现象。

      ABC转运蛋白的过表达加速了毒性剂从细胞中去除,例如化疗剂从肿瘤细胞中流出,或抗生素从耐药菌株中流出。

      监管状态

      RUO - 仅供研究用


    相关产品

    货号

    产品名称

    规格

    ENZ-51029-K100

    EFLUXX-ID® Green multidrug resistance assay kit药检测试剂盒(绿色荧光)

    1 Kit

    ENZ-51030-K100

    EFLUXX-ID® Gold multidrug resistance assay kit EFLUXX-ID® 耐药检测试剂盒(金色荧光)

    1 Kit