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    mRNA疫苗、CAR-T细胞治疗必不可少的加帽酶

    随着mRNA在医学领域的研究和应用不断拓展,其应用越来越广阔。其中,在CAR-T细胞治疗、CAR-NK技术、疫苗等领域的研究成为热点(下图)。而牛痘病毒加帽酶能给mRNA加帽,大幅提高mRNA的稳定性和启动mRNA的翻译。体外加帽嵌合抗原受体(CAR)的mRNA,在免疫细胞内稳定表达,高效识别癌细胞。同理,牛痘病毒加帽酶在mRNA疫苗的应用中也是对外源抗原mRNA进行加帽,使其在细胞内稳定表达。


    mRNA加帽在医学领域的应用

    真核生物体内会对转录形成的mRNA进行加帽,即在mRNA的5’端添加一个甲基化的鸟苷酸帽子(m7GPPPN结构),从而保护mRNA免遭核酸外切酶的攻击以增加mRNA的稳定性,并且协助mRNA与核糖体的结合以促进翻译起始。生物体内的帽子结构有cap0,cap1,cap2三种形式,三者的关系如下图。牛痘病毒加帽酶能够在mRNA的5’端添加cap0帽子,再使用甲基转移酶处理即可得到cap1帽子。


    三种帽子的结构

    牛痘病毒加帽酶能够在一小时之内对mRNA进行加帽,效率达到100%,并且方向正确。它同时兼具mRNA三磷酸酯酶活性、鸟苷酰基转移酶活性和鸟嘌呤甲基转移酶活性。而这三种酶活性是由D12和D1两个亚基构成(下图)。其中,D1亚基具有RNA 三磷酸酶和鸟苷转移酶活性;D12 亚基具有鸟嘌呤甲基转移酶活性。

    牛痘病毒加帽酶的结构和加帽过程

    mRNA的应用已经进入医疗领域,特别是2019新型冠状病毒COVID-19的出现,掀起了行业内对mRNA疫苗研发的浪潮,Moderna、上海斯微生物、NIH等国内外知名机构都积极的投入研究(见公众号相关阅读,mRNA疫苗:新冠疫情的终结者?)。近岸蛋白质开发的加帽酶系统,能够在体外高效加帽mRNA,目前已经应用在CAR-T细胞和mRNA疫苗研究之中,获得客户的一致好评。

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    文章转自:https://www.novoprotein.com.cn/Cn/contact/innews/id/170/catid/66.html