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    Di家族细胞膜荧光染料选择区分DiD,DiO,DiI,DiR

    Di家族细胞膜荧光染料选择区分DiDDiODiIDiR


    DiI, DiO, DiDDiR作为类长链的亲脂性二烷基碳菁类染料(Dialkylcarbocyanines)荧光染料家族,用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构。作为类环境敏感型荧光染料,当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子(例如蛋白质,虽然在水中其荧光强度很弱)结合时,其荧光强度显著增强。旦进入细胞后,它们在细胞内质膜中逐步扩散,于恰当浓度条件下可将整个细胞均匀染色。这些染料具很高的淬灭系数,偏光依赖性和很短的激发寿命。

    四种细胞膜染料的区别:

          DiD染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。

          绿色荧光、亲脂性羰花青DiOC18(3)被广泛用作亲脂示踪剂。它在水里是弱荧光的,但当嵌入膜时,它的荧光和光稳定性都很好。

          DiI是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂,通常不会影响细胞的生存力。

          DIR是一个亲脂性、近红外荧光花青染料。这个染料常用于标记细胞质膜。两个18-碳链插入到细胞膜,从而特定的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的染料转移。可以用乙醇配置其储存液。细胞染色通常使用的浓度时1-10uM,孵育10-20分钟的。

          它们的荧光颜色区分明显:DiI(橙色荧光)DiO(绿色荧光)DiD(红色荧光) DiR (深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiIDiO可以分别用标准的 FITCTRITC的滤光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激发,有着比DiI更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。 DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。

    四种细胞膜染料的优点:

    1. 应用广泛:主要作用是标记细胞膜,用于活的或固定的神经元等细胞或组织的长期示踪剂,同时还可以标记其他疏水结构,例如外泌体

    2. 不会影响细胞的生存力

    3. 体外培养的条件下可以存活很长时间

    4. 在经过固定的神经元细胞膜上的迁移速率为 0.2-0.6mm/day

    5. 在活的神经元细胞膜上的的迁移速率为 6mm/day

    Di家族荧光染料选择小窍门:

    DiI, DiO, DiD DiR均可染色活细胞或固定细胞及组织(请您根据您的需求选择相应的探针),DiIDiO荧光更亮;DiDDiRD12731)波长更长,更适合组织染色,DiA为亲脂性氨基苯乙烯基染料(dialkylaminostyryl dye),常用于神经元的示踪,可与DiI联合使用进行神经细胞的双色标记。研究发现,某些情况下当DiO不能标记固定组织时,DiA可得到良好标记效果。DiA与磷脂双层膜结合后,光谱迁移明显加强。正由其发射光谱非常广,在适当的滤光片下,可以绿色、橙色,甚至红色荧光被检测到。bob综合app手机客户端生物提供物美价廉的优质产品。

    关于染料的使用注意事项

    1.DiI 可以溶解于无水乙醇、DMSO DMF,溶解度约为 1-2.5mg/ml,发现较难溶解时可以适当用超声处理以促进溶解。

    2.用于细胞膜荧光标记时,DiI 的常用浓度为 1-25μM,最常用的浓度为 5-10 μM

    3. DiI 可以直接染色活的细胞或组织,染色时间通常为 5-20 分钟。

    4. 染固定的细胞时,通常使用 4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。

    相关产品:

    货号

    产品名称

    分子量

    Ex/Em

    滤光器编号

    S5414

    DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针

    881.7

    484/501 nm

    XF23-Omega, 31001-Chroma

    S5416

    DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针

    933.87

    550/567 nm

    XF32-Omega, 31002-Chroma

    S5419

    DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针

    1052.1

    644/663 nm

    XF47-Omega, 31023-Chroma

    s5422

    DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针

    1013.39

    748/780 nm

    XF112-Omega,41009-Chroma

    S5418

    DiIC16(3) perchlorate 细胞膜橙红色荧光探针

    877.76

    550/567nm

    XF108, XF32-Omega,

    41002, 31002-Chroma

    S5421

    DiA细胞膜荧光探针

    787.04

    491/613 nm

    XF21-Omega,31024-Chroma