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TMB One Solution (HRP-based ELISA)单组分TMB显色液

货号
J4001
售价(元)
789
规格
500ml
CAS号
  • 产品简介
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  • 产品信息:

    货号

    名称

    规格

    储存

    J2001

    TMB One Solution (HRP-based ELISA)单组分 TMB 显色液

    100ml

    2-8℃

    J4001

    TMB One Solution (HRP-based ELISA)单组分 TMB 显色液

    500ml

    2-8℃






    产品简介

    酶联免疫分析技术(ELISA)广泛用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析,辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是 ELISA 技术常用的一种酶,能催化底物如 3,3'5,5'-四甲基联苯胺(TMB)发生显色反应,从而进行定量或定性分析。由于 TMB 比其他显色底物具更高的灵敏度且无致癌性被广泛使用,TMB 主要用于 ELISA,免疫斑点杂交或免疫组化等实验,也有报道将其用于氯的检测分析。通常 TMB 显色试剂由多个组分构成,必须在使用前进行配制,并且容易产生沉淀,使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的 TMB 显色技术,将所有相关试剂全部配在一个溶液,即仅由单一溶液组成,不仅简化了操作步骤,而且使检测结果更加稳定可靠。

    本品专门为 ELISA 实验而设计。检测原理在于 HRP 或其他适当过氧化物酶能催化生成可溶的蓝色产物,此时通常可在 370nm 测定吸光度。当显色反应被酸性溶液(如 0.5-2M H2SO40.5M HCl1M H3PO4)终止后,产物由蓝色转为黄色,此时可在 450nm 测定吸光度。由于本品显色敏感度高,线性浓度范围较宽,极其适合用于定量 ELISA 分析。

    本品用于 ELISA 检测,每个样品通常使用 0.1ml 显色液,则 100ml 本品约检测 1000 个样品,500ml 本品约检测 5000 个样品。

    保存与运输方法

    保存:2-8℃避光保存,2 年有效。

    运输:冰袋运输。

    注意事项

    1) 本品含TMBH2O2,对人体有刺激性,请注意防护。

    2) 如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色,请停止使用。

    3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    使用方法(ELISA

    1) 使用之前,取出适量单组份 TMB 显色液,使其回到室温再开始使用;

    2) 参考 ELISA 检测试剂盒的实验步骤,当与 HRP 标记抗体孵育一段时间后,用适当洗涤液洗涤 3-5 次,每次 3-5min

    3) 洗涤完毕后,去除洗涤液,加入 100μl 单组份 TMB 显色液。

    4) 室温避光孵育 5-30min 或更长时间(可长达 24h),直至显色到预期深浅。【注意】:建议根据实验需求选择最佳试剂用量、显色时间和反应温度。

    5) 直接在 370nm 测定吸光度。或者加入 100μl 0.5-2M H2SO4 终止反应,随后在 450nm 测定吸光度。

    常用问题

    1. 背景显色太深

    1)如果背景(没有样品的对照)显色太深,一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭,如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面,使用经过适当吸附的二抗,以减小二抗的非特异性吸附。

    2)可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。另外,选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间也会有所帮助。

    2. 没有显色或显色太弱

    1)适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果,滴一滴稀释二抗在离心管内,检测二抗是否被正常显色。

    2)可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如生物素检测体系。

    3)可以适当延长显色时间。

    4)如果上述改进不能获得预期效果,可以考虑更换效果更好的一抗或 ELISA 试剂盒。