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SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料

货号
W751-500UL
售价(元)
2950
规格
500µl
CAS号
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  • 产品信息

    货号

    名称

    规格

    价格

    W751-100UL

    SYBR Green I  (10,000× in DMSO)  核酸凝胶染料

    100µl

    780

    W751-500UL

    SYBR Green I  (10,000× in DMSO)  核酸凝胶染料

    500µl

    2950





    产品简介

    SYBR Green I,一种灵敏度非常高的dsDNA荧光染料,常用于核酸琼脂糖凝胶/聚丙烯酰胺凝胶电泳。SYBR Green I染料的最大激发波长为497nm,但是在~290nm和~380nm处有二级激发峰。与DNA结合的SYBR Green I染料的荧光发射集中在520nm。因此,该染料可适用于多种凝胶检测仪。

    本品是溶于DMSO的SYBR Green I 10,000×染液。

    运输和保存方法

    冰袋运输。于-20°C避光保存,有效期1年。

    注意事项

    1)独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I 的致突变性明显比溴化乙锭要低得多,目前尚无关于SYBR Green I 染料对人体的致突变性或毒性的数据,但我们必须提醒用户注意,该染料能与DNA结合,因此,它应当被看做潜在诱变剂,在使用前小心谨慎。另外,在处理DMSO储存液时应特别小心,因为DMSO能促进有机分子进入组织。染料的处理应当符合当地的规定。

    2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    使用方法

    【开始使用前】

    使用前将本品取出并回温至室温,使DMSO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液至管底。第一次使用时可将本品分装成多个小份后冻存,小份染料将更快速熔解。

    一、 染色

    1 电泳后DNA染色

    1)在琼脂糖或非变性聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳。

    【注】:TBE和TAE缓冲液均适合于SYBR Green I染料。

    2)用TE、TAE或TBE将SYBR Green I进行10000倍稀释。

    【注】:① SYBR Green I染色对pH敏感,为获得最佳的灵敏度,应确认在染色温度下染色液的pH值在7.5-8.0之间(pH8.0更佳)。

    ② 用水配制的染色液不如用缓冲液配制的稳定,为得到较好灵敏度,必须在24h内使用。

    3)染液要充分覆盖凝胶,室温轻摇孵育10-40min。

    【注】:① 推荐用塑料而不是玻璃容器来储存染色液,应为染料会吸附到玻璃表面。

           ② 染色过程避光进行,建议在容器上加盖铝箔或置于暗处。

           ③ 凝胶厚度及琼脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同,染色时间将有所不同。

           ④ 无需脱色。

           ⑤ 染液可置暗处(最好是冷藏)放置至少1周,重复使用最多4次。

    2 电泳前DNA染色

    1)一般选择配制成SYBR Green I预制凝胶来实验。

    临灌胶前将SYBR Green I储存液按照1:10000倍稀释到凝胶溶液中,预制成含有SYBR Green I染料的琼脂糖或非变性聚丙烯酰胺凝胶。预制的SYBR Green I凝胶的DNA检测下限(大约为30-40pg/条带),略高于电泳后染色(<20pg/条带)。此外,在SYBR Green I凝胶中的DNA片段迁移率明显比无染料凝胶中的相同片段慢。

    2)作为DNA模板预染标记。

    一般而言,DNA在电泳前与染料工作液至少孵育15min。

    二、 凝胶成像(紫外或蓝光透射仪或紫外顶置光源直射)

    可在紫外或蓝光光源下轻松观察到用SYBR Green I染色的DNA。

    三、从双链DNA中去除SYBR Green I

    将SYBR Green I染色的DNA移至100mM NaCl中,加入2.5倍体积的无水或95%的乙醇。在冰上孵育约20min,在4℃离心至少10min。去除乙醇,并用70%乙醇洗涤沉淀。让乙醇挥发,用TE重悬双链DNA即可。

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